Klíčový enzym anaerobní glukolýzy zajišťující oxidaci glyceraldehyd-3-P na kys. 1,3-bisfosfoglycerovou. Reakce probíhá v několika krocích. Substrát je vázán na -SH skupinu enzymu a dále je oxidován NAD+ na thioester (makroergická sloučenina). Poté je thioesterová vazba štěpena fosfátem za vzniku kys. 1,3-bisfosfoglycerové.